DETECCIÓN DE Plasmodium sp. A PARTIR DE MUESTRAS FECALES DE PRIMATES NO HUMANOS DE LAS CIUDADES DE TENA, PUYO Y MACAS MEDIANTE NESTED-PCR
DETECTION of Plasmodium sp. FROM FECAL SAMPLES OF NON-HUMAN PRIMATES FROM THE CITIES OF TENA, PUYO AND MACAS USING NESTED-PCR
Fernanda Pérez c, Sarah Martin Solano a b c, Fabián Sáenz d, Elizabeth Minda f, Juan Carlos Navarro e, Gabriel Carillo b f
a Primatology Research Group, Behavioural Biology Unit, Department of Biology, Ecology and Evolution, Faculty of Science, University of Liège, Liège, Belgium
b Instituto de Salud Pública y Zoonosis - CIZ, Universidad Central del Ecuador, Quito, Ecuador
c Departamento Ciencias de la Vida y de la Agricultura, Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE, Sangoluí, Ecuador
d Centro de Investigación para la Salud en América Latina, Escuela de Ciencias Biológicas, Pontificia Universidad Católica del Ecuador, Quito, Ecuador
e Universidad Internacional SEK, Quito, Ecuador
f Carrera de Ciencias Naturales y del Ambiente, Biología y Química, Universidad Central del Ecuador, Ciudadela Universitaria, UCE, Quito, Ecuador
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RESUMEN
Las infecciones de malaria son causadas por el parásito protozoario Plasmodium sp. Las especies como Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax y Plasmodium malariae que se creía antes solo afectaba a humanos, actualmente se ha encontrado que los PNH pueden ser reservorios silvestres de estas especies de Plasmodium. De igual forma, las especies Plasmodium simium y Plasmodium brasilianum se creía que parasitaban únicamente a PNH, pero se ha reportado que puede infectar a humanos, siendo los mosquitos del género Anopheles el principal vector de transmisión. En el Ecuador y América latina no existen reportes sobre infección natural de malaria en PNH por Plasmodium falciparum. El objetivo de esta investigación es diagnosticar mediante Nested-PCR Plasmodium sp. en muestras fecales como una técnica no invasiva. Se analizaron un de total 117 muestras (106 individuos) de 11 especies diferentes de PNH. La prevalencia del Plasmodium sp. fue de 25.64 % (n = 30), 23.00 % (23/100) para los primates en cautiverio y 41.17 % (7/17) para los primates en libertad. Las especies positivas para género fueron: Cebus albifrons, Lagothrix lagotricha, Saguinus fuscicollis, Sapajus apella, Alouatta seniculus, Ateles belzebuth, Cebuella pygmaea, Callicebus lucifer, Saimiri sciureus. La prevalencia de Plasmodium falciparum fue de 3.42 %. Las especies positivas fueron: Sapajus apella, Lagothrix lagotricha, Saguinus fuscicollis y Callicebus lucifer. Se comparó también la prevalencia de acuerdo al sexo, edad y especie, análisis que informó que solo existía diferencia significativa en la infección por Plasmodium sp. de acuerdo a la especie de primate (P = 0.0004), siendo Callicebus lucifer la de mayor prevalencia (100 %). Para validar la sensibilidad de la técnica se realizaron diluciones de muestras infectadas artificialmente con P. falciparum, obteniéndose una límite de detección con la dilución 1:10 y con la parasitemia de 0.73 % (73 000 parásitos/µL de glóbulos rojos). Por lo que se debe tomar en cuenta para los programas de erradicación de malaria que los PNH en el Ecuador son un reservorio natural de Plasmodium falciparum.
Palabras claves: Primates no humanos, vector de transmisión, muestra no invasiva, parásito, reservorio.
ABSTRACT
Malaria infections are caused by the protozoan parasite Plasmodium sp. Currently, species such as Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax and Plasmodium malariae, which were previously thought to affect only humans, have been found to be wild reservoirs of these Plasmodium species. Similarly, the species Plasmodium simium and Plasmodium brasilianum were believed to parasitize only NHP, but have been reported to infect humans, with mosquitoes of the genus Anopheles being the main vector of transmission. In Ecuador and Latin America there are no reports of natural malaria infection in NHP by Plasmodium falciparum. The aim of this research is to diagnose Nested-PCR Plasmodium sp. in faecal samples as a non-invasive technique. A total of 117 samples (106 individuals) of 11 species number were analyzed. The prevalence of Plasmodium sp. was 25.64 % (n = 30), 23.00 % (23/100) for primates in captivity and 41.17 % (7/17) for free-ranging primates. The positive species for genus were: Cebus albifrons, Lagothrix lagotricha, Saguinus fuscicollis, Sapajus apella, Alouatta seniculus, Ateles belzebuth, Cebuella pygmaea, Callicebus lucifer, Saimiri sciureus. The prevalence of Plasmodium falciparum was 3.42 %. Positive species for this were: Sapajus apella, Lagothrix lagotricha, Saguinus fuscicollis and Callicebus lucifer. We also compared the prevalence according to sex, age and species, analysis that reported that there was only a significant difference in Plasmodium sp. infection according to the primate species (P = 0.0004), with Callicebus lucifer being the most prevalent (100 %). To validate the sensitivity of the technique, dilutions were performed on samples artificially infected with P. falciparum, obtaining a detection limit with dilution 1:10 and with parasitaemia of 0.73 % (73 000 parasites/μL of red blood cells). Therefore, it should be taken into account for malaria eradication programs that the NHPs in Ecuador are a natural reservoir of Plasmodium falciparum.
Key words: Non-human primates, transmission vector, non-invasive sample, parasite, reservoir.
