Se diseñaron tres medios de cultivo (mugLPl, mugLP2 y mugLP3), para estudiar la cinética de crecimiento de bacterias ácido lácticos autóctonos aislados del musílago de cacao. En el diseño de los medios se utilizó el paquete estadístico Desing Expert versión 8 para obtener un diseño factorial de 3 x 2, donde se evaluaron como factores las concentraciones de musílago, fosfatos y extracto de levadura seca. Como variables respuestas se analizaron los parámetros de crecimiento (velocidad de crecimiento, tiempo de generación, total de microorganismos) de tres cultivos mixtos de bacterias acido lácticas (BAL), mesófilas y termófilas para valorar la efectividad del medio también se evaluó la tasa de recobrado comparando con el medio patrón MRS. Los microrganismos utilizados fueron cultivados en no menos de 18 horas después del primer pase del cultivo liofilizado y permanecieron entre 9-12 horas cultivados a sus temperaturas óptimas de crecimiento. La toma de muestras para ensayo de las curvas de crecimiento se realizó durante 30 minutos hasta fase logarítmica, luego se tomaron cada una hora hora siguiendo los protocolos establecidos para banco de cepas de BAL. En todos los casos la tasas de recobrado de los microorganismos fueron comparables con el medio patrón y superiores al 70%. El comportamiento de los parámetros cinéticos de los microorganismos exhibió valores en rangos estables, acordes a los registrados por la literatura. El medio mugLPl resultó ser el más adecuado para el cultivo in vitro de los aislamientos. Los microorganismos termófilos se favorecieron en la tasa de crecimiento y recobrado en un 75% y el medio mugLP3 fue el más favorable para el crecimiento de microorganismos mesófilos con una tasa de reobrado del 85%. El mayor logro de este trabajo es el haber diseñado un medio natural definido para suplir la utilización del MRS en los experimentos de laboratorio, además de contar con un medio natural a partir de un desecho agroindustrial, que a la vez contribuye a favorecer la recuperación de los microorganismos (bacterias ácido lácticas) liofilizados a escala industrial.